江南秋

张韦 谢青 周霞秋 姜山 金由辛
- ~- |8 F: S9 N" ]1 W3 s' s. J/ G中华肝脏病杂志
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7 C. p; [& M0 i2 m5 K( Z目的  设计并合成抗小鼠半胱氨酸蛋白酶-7（caspase-7）的锤头状核酶，并对它们的体外表达与体外切割活性进行研究。 方法  采用计算机软件对锤头状核酶和小鼠caspase-7基因的二级结构进行分析，核酶的DNA序列在体外由自动合成仪合成，小鼠caspase-7目的基因通过RT-PCR扩增获得，将核酶基因和caspase-7基因分别克隆入载体pBSKneoU6′和pGEM-T中，通过体外转录得到核酶和caspase-7 mRNA，通过体外切割筛选出具有切割活性的核酶。 结果  针对目的基因的333和394位点设计合成了两个核酶：Rz333和Rz394。成功获得caspase-7 mRNA的表达载体pC7及含有核酶的重组质粒pU6Rz333和pU6Rz394，通过体外转录表达出含有caspase-7 mRNA的987nt的靶mRNA及完整的核酶Rz333（47nt）和Rz394（50nt）。体外切割实验证实Rz333能够定点切割caspase-7 mRNA，产生243nt和744nt的切割产物，切割效率为67.98％。Rz394不能切割靶基因。 结论  核酶Rz333能够位点特异性的切割caspase-7 mRNA。

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目的  探讨非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠血浆前列环素（PGI2）和血栓素（TX）A2的动态变化及其与肝组织学改变之间的关系。 方法  48只模型组SD大鼠给予高脂肪高胆固醇饮食饲养，分批于第8、12、16、24周处死，24只正常饮食大鼠作对照。放射免疫法检测血浆PGI2和TXA2的稳定代谢产物6-酮-前列环素1α(PGF1α)和TXB2含量，光镜观察肝组织切片病理学改变。 结果  模型组大鼠8周呈现单纯性脂肪肝，12～24周从脂肪性肝炎进展至脂肪性肝纤维化。模型组大鼠血浆TXB2在造模第8、24周分别为（52.4±3.15）ng/L和（117.7±7.47）ng/L，对照组为（41.1±1.45）ng/L，t值为9.12和31.34，P<0.01和P<0.001。血浆PGF1α水平在造模8、24周分别为（31.1±1.6）ng/L和（3.4±2.4）ng/L，对照组为（36.5±1.7）ng/L，t值为6.27和34.62，P<0.01和P<0.001。模型组大鼠血浆TXB2和PGF1α水平分别与其肝组织损伤程度呈显著正相关（r＝0.537，P<0.001）及负相关（r＝-0.452，P<0.01）。 结论  持续24周的高脂饮食可以成功复制大鼠NAFLD模型，模型大鼠血浆TXA2与PGI2平衡失调，可能参与NAFLD的发病。