抗半胱氨酸蛋白酶-7核酶的克隆、体外表达与切割活性的研究
张韦 谢青 周霞秋 姜山 金由辛M w8f9Y5U"K中华肝脏病杂志
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目的 设计并合成抗小鼠半胱氨酸蛋白酶-7（caspase-7）的锤头状核酶，并对它们的体外表达与体外切割活性进行研究。 方法 采用计算机软件对锤头状核酶和小鼠caspase-7基因的二级结构进行分析，核酶的DNA序列在体外由自动合成仪合成，小鼠caspase-7目的基因通过RT-PCR扩增获得，将核酶基因和caspase-7基因分别克隆入载体pBSKneoU6′和pGEM-T中，通过体外转录得到核酶和caspase-7 mRNA，通过体外切割筛选出具有切割活性的核酶。 结果 针对目的基因的333和394位点设计合成了两个核酶：Rz333和Rz394。成功获得caspase-7 mRNA的表达载体pC7及含有核酶的重组质粒pU6Rz333和pU6Rz394，通过体外转录表达出含有caspase-7 mRNA的987nt的靶mRNA及完整的核酶Rz333（47nt）和Rz394（50nt）。体外切割实验证实Rz333能够定点切割caspase-7 mRNA，产生243nt和744nt的切割产物，切割效率为67.98％。Rz394不能切割靶基因。 结论 核酶Rz333能够位点特异性的切割caspase-7 mRNA。
非酒精性脂肪性肝病大鼠血浆前列环素与血栓素的变化及其与肝脏损伤的关系
目的 探讨非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠血浆前列环素（PGI2）和血栓素（TX）A2的动态变化及其与肝组织学改变之间的关系。 方法 48只模型组SD大鼠给予高脂肪高胆固醇饮食饲养，分批于第8、12、16、24周处死，24只正常饮食大鼠作对照。放射免疫法检测血浆PGI2和TXA2的稳定代谢产物6-酮-前列环素1α(PGF1α)和TXB2含量，光镜观察肝组织切片病理学改变。 结果 模型组大鼠8周呈现单纯性脂肪肝，12～24周从脂肪性肝炎进展至脂肪性肝纤维化。模型组大鼠血浆TXB2在造模第8、24周分别为（52.4±3.15）ng/L和（117.7±7.47）ng/L，对照组为（41.1±1.45）ng/L，t值为9.12和31.34，P<0.01和P<0.001。血浆PGF1α水平在造模8、24周分别为（31.1±1.6）ng/L和（3.4±2.4）ng/L，对照组为（36.5±1.7）ng/L，t值为6.27和34.62，P<0.01和P<0.001。模型组大鼠血浆TXB2和PGF1α水平分别与其肝组织损伤程度呈显著正相关（r＝0.537，P<0.001）及负相关（r＝-0.452，P<0.01）。 结论 持续24周的高脂饮食可以成功复制大鼠NAFLD模型，模型大鼠血浆TXA2与PGI2平衡失调，可能参与NAFLD的发病。页:
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